附件：藥包材微生物檢測指導(dǎo)原則公示稿（第二次）

9627 藥包材微生物檢測指導(dǎo)原則

本指導(dǎo)原則為藥包材（主要針對直接接觸藥品的包裝材料和容器）成品質(zhì)量控制中微生物檢測項目設(shè)置、方法建立、接受標準以及檢測頻次等提供指導(dǎo)。

1 檢測項目

藥包材的微生物控制對于控制藥品微生物污染具有重要意義。藥包材成品的微生物檢測項目一 般包括無菌、生物負載和微生物限度。無菌藥包材一般直接用于無菌工藝生產(chǎn)的無菌藥品，藥包材生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)對滅菌工藝進行充分驗證，并按已驗證的工藝進行精確控制，確保每批放行產(chǎn)品的無菌性。藥包材生產(chǎn)企業(yè)宜在企業(yè)標準中對無菌藥包材成品設(shè)置無菌項目，并嚴格按照放行規(guī)程進行產(chǎn)品放行。

用于無菌藥品的非無菌藥包材，生物負載測定是對其存活微生物總數(shù)進行測定的過程，生物負載測定數(shù)據(jù)有助于藥品生產(chǎn)企業(yè)清洗和/或滅菌工藝的開發(fā)、驗證和常規(guī)控制。是否要對藥包材成品設(shè)置生物負載測定項目，一般由供需雙方在企業(yè)標準或質(zhì)量協(xié)議中規(guī)定。供需雙方宜基于質(zhì)量風險管理的要求，根據(jù)產(chǎn)品特性、污染控制措施、歷史數(shù)據(jù)等綜合評估生物負載測定的必要性。需要指出的是，根據(jù)生物負載數(shù)據(jù)的具體使用目的，在進行生物負載測定的基礎(chǔ)上，有時還需對生物負載進行進一步微生物鑒定?；陲L險的微生物菌群評估方法對于確保產(chǎn)品質(zhì)量至關(guān)重要。

用于非無菌藥品的非無菌藥包材，是否要對藥包材成品設(shè)置微生物限度項目，一般由供需雙方在企業(yè)標準或質(zhì)量協(xié)議中規(guī)定?？蓞⒖?/span>ICH Q6A等國內(nèi)外相關(guān)技術(shù)指導(dǎo)原則評估微生物限度檢查的必要性。

2 檢測方法

本指導(dǎo)原則規(guī)定的檢測方法是以微生物繁殖為基礎(chǔ)的傳統(tǒng)培養(yǎng)方法。隨著微生物分析技術(shù)的迅速發(fā)展，一些快速或?qū)崟r檢測技術(shù)可引入到微生物質(zhì)量控制中。在采用新檢測技術(shù)時，應(yīng)根據(jù)不同應(yīng)用場景參考藥品微生物檢驗替代方法驗證指導(dǎo)原則（指導(dǎo)原則9201）等國內(nèi)外相關(guān)指導(dǎo)原則進行替代方法的驗證。

2.1 無菌檢查

藥包材無菌檢查可參照無菌檢查法（通則 1101）進行。檢驗數(shù)量一般參照無菌檢查法（通則 1101）中的“醫(yī)療器械”。無菌藥包材需要在潔凈區(qū)內(nèi)參與藥品的無菌加工，一般需對供試品的內(nèi)外表面進行無菌檢查。鑒于藥包材的形制等與藥品不同，可按照如下方法或經(jīng)驗證的其他方法進行供試品處理及接種培養(yǎng)基，未列出的品種可參照進行。預(yù)灌封注射器、軟膏管、橡膠密封件等供試品 取供試品，必要時將其拆散或切碎，等量接種于各管足以浸沒供試品的適量培養(yǎng)基中。

塑料瓶、滴眼劑瓶、軟袋等供試品 取供試品，分別用沖洗液充分沖洗供試品內(nèi)外表面，將沖洗液合并，然后參照無菌檢查法（通則 1101）“水溶性液體供試品”項下方法操作。

2.2生物負載測定

2.2.1 方法設(shè)計

樣品數(shù)量生物負載水平的常規(guī)監(jiān)測通常取 3~10 個供試品。

樣品份額一般采用整個供試品進行生物負載測定。若存在實驗室容器難以容納整個供試品等情況，可使用代表性部分進行，如片材類藥包材可依據(jù)表面積確定樣品份額。 微生物采集根據(jù)藥包材的形制，常用的微生物采集方法包括振搖法（機械或人工方式）、沖洗法、超聲波洗脫法、袋蠕動法等，其中振搖法和沖洗法最為常用。一般可采用 pH 7.0 無菌氯化鈉?蛋白胨緩沖液、0.9%無菌氯化鈉溶液等洗脫液，必要時采用含表面活性劑（聚山梨酯 80 或卵磷脂）的洗脫液進行藥包材微生物的采集。接種培養(yǎng)基接種培養(yǎng)基的方法一般包括：薄膜過濾法、平板傾注法、平板涂布法。根據(jù)藥包材的低生物負載特性，接種培養(yǎng)基宜優(yōu)先采用薄膜過濾法。洗脫液過濾后，轉(zhuǎn)移濾膜菌面朝上貼于適宜的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。

微生物培養(yǎng)培養(yǎng)條件應(yīng)在考慮可能存在的微生物類型后進行選擇。藥包材不太可能受到專性厭氧菌的污染，可不考慮該測試。一般可將需氧菌、霉菌和酵母菌合并測試，將全部的供試液過濾到一張濾膜上，放置在合適的通用培養(yǎng)基上（如胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基）進行培養(yǎng)（如 20°C～25°C培養(yǎng) 2～3 天，30°C～35°C 培養(yǎng) 3～4 天），或者其他經(jīng)驗證的培養(yǎng)條件。其中培養(yǎng)基的配制、滅菌、貯藏以及質(zhì)量控制等宜符合非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物計數(shù)法（通則 1105）、藥品微生物實驗室質(zhì)量管理指導(dǎo)原則（指導(dǎo)原則 9203）的要求。微生物計數(shù)采用薄膜過濾法進行微生物計數(shù)時，每張濾膜上的菌落數(shù)宜不超過 50cfu。以相當于1個供試品的菌落數(shù)報告測定結(jié)果。

2.2.2 方法驗證

生物負載測定的方法驗證有兩個方面需要考慮。一是評估測試方法的適用性，以證明測試過程對微生物無生長抑制作用，可參考非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物計數(shù)法（通則 1105）進行。二是評估測試方法的回收率，用回收率的校正因子對結(jié)果進行校正以補償無法完全從產(chǎn)品和/或微生物培養(yǎng)中采集的微生物數(shù)量，方法回收率試驗一般采用人工接種產(chǎn)品的方式，可參考 GB/T19973.1《醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌微生物學(xué)方法第 1 部分：產(chǎn)品上微生物總數(shù)的確定》進行。

2.3 微生物限度檢查

藥包材微生物限度檢查可參照非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物計數(shù)法（通則 1105）、非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：控制菌檢查法（通則 1106）進行，優(yōu)先采用薄膜過濾法。容器類、實體類等供試品的檢驗量不少于 5 個；片材類供試品的檢驗量不少于 500cm2（按單面計），取 5 等份，每份 100cm2。以相當于1個或100cm2供試品的菌落數(shù)報告需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)結(jié)果，以相當于1個或100cm2供試品中是否檢出控制菌報告控制菌檢查結(jié)果。

鑒于藥包材的形制等與藥品不同，可按照如下方法或經(jīng)驗證的其他方法進行供試液制備，未列出的品種可參照進行。容器類（瓶、管等）供試品取供試品，采用沖洗法，每個供試品分別加入一定體積（依供試品標示容量按比例確定）沖洗液，振搖一定時間，充分沖洗供試品內(nèi)腔，將沖洗液合并，即得供試液。

在振搖之前，采用適宜的方式將供試品密閉（如將瓶蓋旋緊、用夾子將管尾端密閉等）。實體類（密封件、墊片等）供試品取供試品，采用振搖法，合并供試品投入盛有一定體積（依

供試品個數(shù)按比例確定）沖洗液的無菌容器中，振搖一定時間，充分沖洗供試品，即得供試液。必要時，可預(yù)先剪碎處理。視情況可分別沖洗供試品，將沖洗液合并，即得供試液。片材類（鋁箔、膜、硬片等）供試品取供試品，采用振搖法，每份供試品分別投入盛有一定體

79 積（依供試品取樣面積按比例確定）沖洗液的無菌容器中，振搖一定時間，充分沖洗供試品，將沖洗液合并，即得供試液。必要時，可預(yù)先剪碎處理。視情況可合并供試品制備供試液。

3 接受標準

3.1 無菌檢查接受標準

無菌檢查接受標準應(yīng)符合無菌檢查法（通則 1101）的規(guī)定，應(yīng)無菌生長。

3.2 生物負載水平

生物負載的可接受水平是基于生產(chǎn)過程正常運行條件下收集到的歷史數(shù)據(jù)建立的，反映了生產(chǎn)過程的風險控制要求限值。同時，生物負載水平的建立也宜考慮隨后清洗和/或滅菌工藝的經(jīng)濟性以及對藥品內(nèi)毒素水平的影響等。在滿足藥品安全性、有效性等方面考量的基礎(chǔ)上，一般由供需雙方在企業(yè)標準或質(zhì)量協(xié)議中規(guī)定。需要指出的是，一些特殊的藥包材需要在藥品生產(chǎn)企業(yè)進行加工后使用，比如共擠膜加工成輸液袋等，其加工工藝可能會影響藥包材出廠時的生物負載水平，藥品生產(chǎn)企業(yè)宜對加工工藝帶來的生物負載水平的變化進行合理評估。

3.3 微生物限度標準

微生物限度檢查一般包括微生物計數(shù)和控制菌檢查，其中微生物計數(shù)包括需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)檢查。相應(yīng)限度標準包括需氧菌總數(shù)限度標準、霉菌和酵母菌總數(shù)限度標準以及控制菌的種類。藥包材微生物限度標準的制定宜綜合考慮其原料來源及性質(zhì)、生產(chǎn)工藝條件、使用用途、藥品給藥途徑、藥品限度標準及微生物污染對患者的潛在危險等因素。限度標準應(yīng)能保證藥品安全性、有效性的要求，一般可由供需雙方在企業(yè)標準或質(zhì)量協(xié)議中規(guī)定。需要指出的是，一些特殊的藥包材需要在藥品生產(chǎn)企業(yè)進行加工后使用，比如硬片加工成泡罩等，其加工工藝可能會改變藥包材出廠時的微生物水平，藥品生產(chǎn)企業(yè)宜對加工工藝帶來的微生物水平的變化進行合理評估。

4 檢測頻次

需要進行無菌檢查的藥包材，藥包材生產(chǎn)企業(yè)宜對產(chǎn)品進行逐批檢查。生物負載測定頻次的確定宜基于風險評估，體現(xiàn)如因季節(jié)變化、生產(chǎn)變更或材料變更引起的生物負載變化，可根據(jù)時間（如每月、每季度）或生產(chǎn)量（如間隔批次）等原則進行，由供需雙方在企業(yè)標準或質(zhì)量協(xié)議中規(guī)定，應(yīng)保證每批產(chǎn)品的生物負載均符合可接受水平。微生物限度檢查頻次可參考 ICH Q6A 和國內(nèi)外相關(guān)技術(shù)指導(dǎo)原則，由供需雙方在企業(yè)標準或質(zhì)量協(xié)議中規(guī)定，應(yīng)保證每批產(chǎn)品的微生物限度均符合限度標準。

藥包材微生物檢測指導(dǎo)原則起草說明

1.制修訂的目的意義

本指導(dǎo)原則基于風險管理的理念，為藥包材成品質(zhì)量控制中微生物檢測項目設(shè)置、方法建立、

接受標準以及檢測頻次等提供指導(dǎo)，以滿足藥包材生產(chǎn)企業(yè)質(zhì)量標準制定和微生物控制的需求。

2.需要重點說明的問題

2.1.對標準范圍的說明

本指導(dǎo)原則著重解決各種藥包材成品微生物檢測該檢測什么、怎么檢測、指標是什么以及常規(guī)檢測策略的問題,配套藥包材標準體系中各通則的構(gòu)建，為藥包材生產(chǎn)企業(yè)質(zhì)量標準的建立提供指南。藥包材生產(chǎn)環(huán)境的沉降菌、浮游菌、表面微生物以及工藝用水/用氣等通用微生物檢監(jiān)測技術(shù)不在本指導(dǎo)原則范圍以內(nèi)。第一次公示時編號為9653，本次改為9627。

2.2.對檢測項目設(shè)置的說明

對于無菌檢查和微生物限度檢查的要求與藥品基本一致。為了清洗及滅菌工藝的有效驗證和常規(guī)控制，本指導(dǎo)原則引入生物負載測定，提高藥包材質(zhì)量控制水平，為無菌藥品的質(zhì)量控制提供保證。需要指出的是，本指導(dǎo)原則中的生物負載并不涵蓋無菌藥包材生產(chǎn)企業(yè)過程控制中的生物負載。

2.3.對檢測方法的說明

由于藥包材種類繁多，難以針對每個品種給出具體的、明確的試驗方法及參數(shù)，同時考慮生產(chǎn)企業(yè)方法建立個性化、自主性的需求，本指導(dǎo)原則給出了無菌檢查、生物負載測定和微生物限度檢查方法設(shè)計和驗證的指南，不同類型藥包材生產(chǎn)企業(yè)可以根據(jù)本指導(dǎo)原則建立方法并完成方法驗證后，在常規(guī)檢測中采用驗證的方法實施日常檢測。

2.4.對接受標準的說明

無菌檢查為定性試驗。與微生物限度不同，生物負載測定主要為隨后的清洗和/或滅菌提供信息，藥包材攜帶的微生物會被滅菌工藝殺滅，不會進入藥品，但生物負載水平的建立也宜考慮隨后滅菌工藝的經(jīng)濟性以及對制劑內(nèi)毒素水平的影響等。生物負載測定主要基于生產(chǎn)過程正常運行條件下收集到的歷史數(shù)據(jù)建立，也由供需雙方在企業(yè)標準或質(zhì)量協(xié)議中規(guī)定。對于微生物限度檢查，由于藥包材攜帶的微生物會進入藥品后接觸患者，所以限度標準的制定宜綜合考慮原料來源及性質(zhì)、生產(chǎn)工藝條件、藥品給藥途徑及微生物污染對患者的潛在危險等因素，

一般參照藥品考慮需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)以及控制菌的檢出。在滿足藥品安全性、有效性等方面考量的基礎(chǔ)上，一般由供需雙方在企業(yè)標準或質(zhì)量協(xié)議中規(guī)定。

2.5.對常規(guī)檢測策略的說明

目前藥包材產(chǎn)品的原料多為塑料、玻璃、橡膠、金屬等，這些材料為非天然來源、具有低水分活度、本身不易滋生微生物的特點。而且，藥包材產(chǎn)品的加工工藝多為熱加工，可降低原料本身的初始生物負載，故藥包材產(chǎn)品一般生物負載都比較低。但即使如此，如果藥包材原料的初始生物負載過高，或者藥包材的生產(chǎn)過程控制欠缺等，微生物仍有引入到藥包材產(chǎn)品中的可能。藥包材生產(chǎn)企業(yè)宜基于風險評估制定適宜的檢測策略，避免過度控制及失控情況的出現(xiàn)。

來源:CDE

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